3M檢測片操作
1.固體
以無菌操作將25 g樣品加入到225mL的稀釋液(磷酸鹽緩衝液或0.1%蛋白腖水)中,8000r/min均質2min(或放入無菌均質袋中,用均質器拍打2min),製成1:10樣品勻液。
2.液體
取25 mL樣品原液,放入裝有225 mL,稀釋液的無菌玻璃瓶中,以30cm幅度,7s內振搖25次,製成1:10樣品勻液。將上述勻液做10倍係列梯度稀釋,根據樣品的汙染程度,選擇適宜的2個-3個連續稀釋度,每個稀釋度接種2張測試片。
將PYM檢驗測試片放在平坦的實驗台上,揭開上層膜,用移液器將1ml樣液加到測試片的中央,輕輕覆蓋上層膜,用壓板平穩壓下,使其均勻覆蓋在測試片的圓形培養麵積上,拿起壓板,靜置至少1min,使培養基凝固。
將測試片的透明麵朝上放置於培養箱內,堆疊不能超過20片,在25℃-28℃下培養3d-5d。
培養3d後觀察計數,如果5d後,測試片上的菌生長過快,出現邊緣模糊的菌落,就用3d的計數結果作為估計菌落數。在PYM測試片上,顏色均勻一致,灰白色到藍綠色或粉紅色,沒有暗色中心,邊界明顯的小型隆起菌落計為酵母菌。顏色多樣(棕色、米色、橙色、藍綠色等)、中心顏色深暗的大型或小型扁平擴散菌落計為黴菌。